Eurofins | Evic Romania

Research and Experimentation Center

„Măsoară ceea ce este măsurabil și transformă în ceva măsurabil ceea ce nu se poate măsura.” - Galileo Galilei
RO | EN
Acasa » Clienti » Servicii » Studii de siguranta in vitro

Studii de siguranta in vitro

 

TEST CITOXICITATE IN PLACI CU 96 DE GODEURI

Titlu:

Evaluarea potentialului citotoxic al unui element de test dupa aplicarea pe celule insamantate in placi cu 96 de godeuri – colorare cu rosu neutru

Obiective:

Evaluarea cantitativa a potentialului citotoxic al unui element de test solubil dupa aplicarea pe celule insamantate in placi cu 96 de godeuri.

Sistem de testare:

Celule de cornee de iepure – SIRC

Planificare:

Durata studiului: 4 zile

Inceputul studiului: 1 saptamana dupa primirea mostrei

Raportare: 2-3 saptamani dupa incheierea studiului

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Determinarea citotoxicitatii dupa contactul elementului de test cu celulele, prin colorarea celulelor vii cu un colorant vital (Rosu Neutru).
Calcularea procentului de celule moarte si
IC50 sau concentratia elementului de testare care a inhibat  cu 50% moartea celulelor.

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

Z1: • Punerea in contact cu elementul de test

• Incubare timp de 48 de ore

Z3: • Prepararea solutiei colorante

• Revelarea citotoxicitatii

• Citire

CITOTOXICITATE-ISO 10993-5- EXTRACT

Titlu:

Evaluarea potentialului citotoxic al extrasului dintr-un element de test (dispozitiv medical)

Obiectiv:

Evaluarea cantitativa si calitativa a potentialului citotoxic al unui element testat sub forma de extract dupa aplicarea pe celule insamantate in micro-placi cu 96 de godeuri. 

Sistem de testare:

Fibroblaste din plamani de soarece  – NCTC L929

Planificare:

Durata studiului: 3 zile.

Inceperea studiului: 1 saptamana de la primirea mostrelor.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

Se defineste in functie de tipul de element de test.

Metodologie:

Determinarea citotoxicitatii dupa punerea in contact a extractului dintr-un element de test si a dilutiilor acestuia cu celulele, prin colorarea celulelor vii cu un colorant vital (rosu neutru).

Calcularea procentului de celule moarte si a viabilitatii celulelor  (evaluare cantitativa) si aprecierea aspectului morfologic al celulelor (evaluare calitativa)

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

• Prepararea extractului

Z1: • Punerea in contact a extractului si dilutiilor acestuia cu celulele

• Incubare timp de 24/72 de ore

Z2: • Prepararea solutiei colorante

• Prepararea solutiei revelatoare

• Revelarea citotoxicitatii

CITOTOXICITATE- ISO 10993 – 5 – CONTACT DIRECT

Titlu:

Evaluarea potentialului citotoxic al unui element de test (dispozitiv medical) dupa contact direct

Obiective:

Evaluarea cantitativa si calitativa a potentialului citotoxic al unui element de test dupa contactul direct cu celule insamantate in placi cu 6 godeuri.

Sistem de testare:

Fibroblaste din plamani de soarece – NCTC L929.

Planificare:

Durata studiului: 3 zile.

Inceperea studiului: 1 saptamana de la primirea mostrelor.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

Se defineste in functie de tipul de dispozitiv medical.

Metodologie:

Determinarea citotoxicitatii dupa contactul direct al elementului de test cu celulele, prin colorarea celulelor vii cu un colorant vital (rosu neutru).

Calcularea procentului de celule moarte si a viabilitatii celulelor (evaluare cantitativa) si aprecierea aspectului morfologic al celulelor  (evaluare calitativa).

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

Z1: • Producerea contactului cu elementul de test

• Incubare timp de 24 de ore

Z2: • Prepararea solutiei colorante si a solutiei revelatoare

• Revelarea citotoxicitatii

• Citire

CITOTOXICITATE – ISO 10993 -5 – CONTACT INDIRECT

Titlu:

Evaluarea potentialului citotoxic al unui element de test (dispozitiv medical) dupa contact indirect

Obiective:

Evaluarea cantitativa si calitativa a potentialului citotoxic a unui element de test  dupa contactul indirect cu suprafata unui gel de agaroza in contact cu celulele.

Sistem de testare:

Fibroblaste din plamani de soarece – NCTC L929.

Planificare:

Durata studiului: 3 zile.

Inceperea studiului: 1 saptamana de la primirea mostrelor.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

Se va defini in functie de tipul de dispozitiv medical.

Metodologie:

Determinarea citotoxicitatii dupa contactul unui element de test cu suprafata gelului de agaroza in contact cu celulele,  prin colorarea celulelor vii cu un colorant vital  (rosu neutru).

Calcularea intervalului de dimensiuni al diametrului de liza a celulelor (evaluare cantitativa) si aprecierea aspectului termografic al celulelor (evaluare calitativa).

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

Z1: • Prepararea gelului de agaroza

• Punerea in contact a gelului de agaroza cu celulele

• Punerea in contact cu elementul de test

• Incubare timp de 24 de ore

Z2: • Prepararea solutiei colorante

• Revelarea citotoxicitatii

• Citirea

AGAROZA

Titlu:

Evaluarea potentialului iritant al unui element de test prin determinarea citotoxicitatii dupa difuzie pe gel de agaroza

Obiective:

Evaluarea cantitativa a citotoxicitatii unui element de test.

Sistem de testare:

Fibroblaste din plamani de soarece – NCTC L 929.

Planificare:

Durata studiuluil: 3 zile

Inceputul studiului: 1 saptamana de la primirea mostrei.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiuluil. 

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Determinarea citotoxicitatii prin aprecierea diametrului mediu al ariei de liza a celulelor, revelat prin colorarea celulelor cu un colorant vital MTT dupa aplicarea timp de 24h a elementului de test pe o suprafata cu gel de agaroza in contact cu celulele.

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

Z1 : • Prepararea gelului de agaroza si a elementului de test

• Punerea in contact a gelului cu celulele

• Aplicarea elementului de test

Z2 : • Revelarea citotoxicitatii

• Citirea

NRR

Titlu:

Evaluarea potentialului iritant al unui element de test prin aplicare directa pe fibroblaste de cornee de iepure prin metoda eliberarii de rosu neutru

Obiective:

Evaluarea cantitativa a citotoxicitatii unui element de test.

Sistem de testare:

Fibroblaste de cornee de iepure – SIRC.

Planificare:

Durata studiului: 2 zile

Inceputul studiului: 1 saptamana de la primirea mostrei

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Determinarea citotoxicitatii dupa contactul elementului de test cu un mono-strat de celule marcat cu un colorant vital (Neutral Red). Determinarea IC50.

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

D1: • Colorarea celulelor

• Contact cu dilutiile elementului de test

• Revelarea citotoxicitatii

• Citire

RBC

Titlu:

Evaluarea potentialului iritant al unui element de test prin determinarea puterii sale hemolitice si denaturante impotriva proteinelor (Test de sange RBC)

Obiective:

Evaluarea potentialului iritant al unui element de test cu caracter tensio-activ.

Sistem de testare:

Celule rosii provenite din sangele ovinelor.

Planificare:

Durata studiului: 1 zi

Inceputul studiului: 3 saptamani dupa primirea mostrei

Raportare: 2-3 saptamani dupa incheierea studiului

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Determinarea cantitatii eliberate de hemoglobina (oxyhemoglobina) si proteine denaturate in supernatant prin spectrofotometrie (VISIONliteTM software).

Calcularea concentratiei in elementul de testare, prin inducerea a 50% din liza celulara (H50).

Calcularea indicelui de denaturare (DI) comparat cu denaturarea observata in cazul solutiei de sodium dodecil sulfat.

Calcularea raportului H50/DI si conectarea cu potentialul iritant al ochiului al elementului de testare, in conformitate cu o scara de notare stabilita.

Procedura:

 

• Test hemoliza:

– contactul elementului de test cu celulele rosii din sange

– dozarea hemoglobinei eliberate

• Testarea denaturarii proteinelor:

– dozarea proteinelor denaturate

HET CAM

Titlu:

Evaluarea potentialului iritant al unui element de test dupa aplicarea pe membrana corioalantoica a embrionului din oul de gaina.

Obiective:

Evaluarea semi-cantitativa a potentialului iritant al unui element de test. 

Sistem de testare:

Oua embrionare de gaini albe rasa Leghorn. 

Planificare:

Durata studiului: 1 zi

Inceputul studiului: 1 saptamana de la primirea mostrei

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Observarea efectelor iritante (hiperhemie, hemoragie si coagulare) ce pot aparea dupa aplicarea elementului de test  pe membrana corioalantoica a embrionului din oul de gaina (CAM) in a 10-a zi de incubatie.

Procedura:

Prepararea oualor si a elementului de test

Aplicarea elementului de test

Citiri

BCOP

Titlu:

Evaluarea potentialului iritant a unui element de test dupa aplicarea pe cornee izolata de vitel

Obiective:

Evaluarea semi-cantitativa a potentialului iritant a unui element de test.

Sistem de testare:

Cornee de vitel.

Planificare:

Durata studiului: 2 zile.

Inceperea studiului: 1 saptamana de la primirea mostrelor.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

2 x 30 g

Metodologie:

Masurarea opacitatii si permeabilitatii la fluoresceina a corneei de vitel dupa contactul cu elementul de test, o singura data sau de mai multe ori.

Procedura:

Montarea corneelor inainte de incubare.

Masurarea opacitatii la T0.

Punerea in contact cu elementul de test (2).

Masurarea opacitatii dupa contact.

Masurarea permeabilitatii.

Evaluarea impactului asupra corneei.

SKIN IRRITATION

Titlu:

Evaluarea potentialului iritant a unui element de test dupa aplicarea pe EPISKIN(TM) model de epiderma reconstituita – OECD 439

Obiective:

Evaluarea canitativa a capacitatii unui element de test de a produce o scadere a viabilitatii celulei care penetreaza stratum corneum dupa contactul timp de 15 minute cu epiderma reconstituita.

Sistem de testare:

EPISKINTM cu stratum corneum din keratinocite umane (3 unitati de epiderma)

Planificare:

Durata studiului: 4 zile

Inceperea studiului: 4 saptamani de la primirea mostrelor.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Evaluarea procentajului viabilitatii celulei prin colorarea celulei vii cu un colorant vital (MTT). Masurarea activitatii mitocondriale si citirea densitatilor optice.

Procedura:

Pentru fiecare lot de epiderma reconstituita: 

D-1: • Controlul si depozitarea sistemului de testare dupa primire

D1: • Prepararea epidermei reconstituita

• Contactul cu elementul de test (15 minute)

• Incubare timp de 42 ore

D3: • Revelarea citotoxicitatii

• Incubare timp de 3 ore

• Citire

SKIN CORROSION

Titlu:

Evaluarea coroziunii pielii dupa aplicarea unui element de test pe model de epiderma reconstituita – OECD 431

Obiective:

Evaluarea canitativa a capacitatii unui element de test de a produce o scadere a viabilitatii celulei care penetreaza stratum corneum prin difuzie sau eroziune dupa diferite momente de la contact.

Sistem de testare:

EPISKINTM cu stratum corneum din keratinocite umane (3 loturi – 1/saptamana)

Planificare:

Durata studiului: 3 saptamani

Inceperea studiului: 4 saptamani de la primirea mostrelor.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Evaluarea procentajului viabilitatii celulei prin colorarea celulei vii cu un colorant vital (MTT). Masurarea activitatii mitocondriale si citirea densitatilor optice.

Procedura:

Pentru fiecare lot de epiderma reconstituita:

D-1: • Controlul si depozitarea sistemului de testare dupa primire

D1: • Prepararea epidermei reconstituita (1/timp de contact)

• Contactul cu elementul de test (3 minute – 1 ora – 4 ore)

• Clatirea sistemului de testare

• Revelarea of the citotoxicitatii

D2: • Citire

FOTO – CITOTOXICITATE

Titlu:

Evaluarea potentialului fototoxic al unui element de test solubil – Test fototoxicitate In-vitro 3T3 NRU – OECD 432

Obiective:

Evaluarea cantitativa a potentialului fototoxic al unui element de test solubil dupa expunerea la UV.

Sistem de testare:

Fibroblaste de soarece de laborator 3T3, clona A31

Planificare:

Durata studiului: 3 zile

Inceperea studiului: 1 saptamana de la primirea mostrelor

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului

Cantitatea de produs necesara:

2 x 20 g

Metodologie:

Compararea citotoxicitatii unui element de test cand acesta este testat in prezenta si absenta expunerii (Sol 500 – Dr Hönle) la o doza non-citotoxica de lumina solara simulata. Determinarea viabilitatii celulare prin colorare cu vopsea vitala (rosu netru) si aprecierea factorului de fotoiritare si efectului mediu al luminii.

Procedura:

Z-1: • Insamantarea celulelor

Z1: • Contactul dilutiilor elementului de test (8) cu celulele

• expunere la UV

Z2: • Prepararea solutiei colorante si a solutiei revelatoare

• Revelarea citotoxicitatii

• Citirea

BCOP – OECD 437

Titlu:

Metoda de testare a opacitatii si permeabilitatii corneei de bovine pentru identificarea produselor corozive oculare si extrem de iritante – OECD 437

Obiective:

Identificarea produselor corozive si foarte iritante pentru ochi  (clasa R41).

Sistem de testare:

Cornee de vitel.

Planificare:

Durata studiului: 1 zi.

Inceperea studiului: 1 saptamana de la primirea mostrei.

Raportare: 2-3 saptamani de la incheierea studiului.

Cantitatea de produs necesara:

2 x 30 g

Metodologie:

Masurarea opacitatii si permeabilitatii la fluoresceina a corneei de vitel dupa contactul cu elementul de test in conditii experimentale definite in functie de natura organoleptica a produsului. 

Procedura:

Instalarea corneelor inainte de incubare.

Masurarea opacitatii la T0.

Punerea in contact cu elementul de test.

Masurarea opacitatii dupa contact.

Masurarea permeabilitatii.

Evaluarea impactului asupra corneei.
INAPOI LA SERVICII
Contact Clienti:

    Companie (obligatoriu)

    Nume, Prenume (obligatoriu)

    Telefon(obligatoriu)

    Adresa de email (obligatoriu)